時間：2009-12-23 點擊： 次 來源：陽光畜牧網 作者：佚名 - 小 + 大
| 凝集試驗的原理是：顆?？乖?紅細胞、細菌、病毒等)與含有相應抗體的血清混合,在電解質的參與下, 則能發生特異性結合，形成抗原抗體復合物,這種復合物呈均勻狀態懸浮于液體中,這時肉眼是看不見的,當抗原抗體復合物在一定濃度的電解質作用下,復合物表面的電荷大部分被消除,失去了互相排斥的作用，復合物之間互相吸引，凝集成團,即出現肉眼可見的凝集現象。作用于凝集反應的抗原,稱為凝集原,與之相結合的抗體,稱為凝集素。 凝集反應按其原理可分為直接凝集反應和間接凝集反應兩類。用于豬病診斷的常用操作方法有以下幾種。 (1)全血平板凝集試驗 本試驗在實踐中主要用于細菌性疾病的抗體檢測和抗原(經分離培養后)的鑒定?，F舉例用已知豬丹毒抗原(丹毒桿菌的純培養液)測定被檢豬血清中的抗體。其操作步驟如下： ?、俨牧?豬丹毒凝集抗原,玻片,9號針頭,酒精棉球,酒精燈,鉛耳(取血環)等。 ?、诓僮?用鉑耳取已知抗原1滴,置于玻片上。用酒精棉球擦拭針頭,鉑耳在酒精燈上灼燒消毒。用針頭刺破被檢豬的耳靜脈,以鉑耳取血與玻片上的抗原等量混合,在2－3分鐘內觀察結果。 ?、劢Y果判定 出現顆粒狀的凝集,為陽性反應。否則為陰性。 (2)試管凝集試驗 試管凝集試驗是一種定量法,用于測定被檢血清或其他體液中有否某種抗體及其效價,可作臨床的輔助診斷,或用于流行病學監測。在豬場中,本法常用于豬布氏桿菌病的診斷。 ?、俨牧?布氏桿菌病試管凝集抗原(1：20倍稀釋),布氏桿菌病陽性血清、陰性血清(1：25倍稀釋),稀釋液(0.5% 石炭酸生理鹽水),滅菌小試管,1毫升吸管,試管架,待檢血清等。 ?、诓僮?取試管7支置于試管架上,設陽性和陰性血清及抗原對照各1支,測定管4支,以后每增加一個樣品,只需增加4支測定管。 按表2示意稀釋血清,加抗原,完成后每支管內應含 1毫升液體。 加入抗原后,將試管充分振蕩,置37℃溫箱反應24小時后，判定結果。 ?、叟卸藴? "一" 液體均勻混濁,管底無凝集物,不凝集。 "+" 液體透明度較差,管底有少量凝集物,為25%凝集。 "++" 液體中等混濁,管底有中等量的傘狀沉淀,50%菌體凝集。 "+++" 液體幾乎透明,管底有明顯傘狀沉淀,75%菌體凝集。 "++++" 液體完全透明,管底出現大片的傘狀沉淀,100% 菌體凝集。 結果判定：以出現50%菌體凝集的血清最高稀釋度為該血清的凝集價。在檢測豬布氏桿菌病時,血清凝集價在1：50以上時，可判為陽性反應，若凝集價為1：25則為可疑(需復試驗1次)。如豬群中基本無陽性反應,則凝集價1：25也可判為陰性。 |
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