薛青紅,印春生,李寧,支海兵* (中國獸醫藥品監察所 國家牛瘟參考實驗室 北京100081) 小反芻獸疫(PPR)又名小反芻獸偽牛瘟,是由小反芻獸疫病毒引起的一種急性、烈性、接觸性傳染病,易感群發病率高達100%,暴發嚴重時死亡率達100%。目前該病尚無有效治療方法,主要通過早期診斷和疫苗免疫進行控制。19世紀40年代該病首次在科特迪瓦報道以來,先后在多個國家暴發和流行。2 007年7月,我國西藏地區先后發生4起PPR疫 情,感染近5000只羊 。西藏地區生活著多種珍稀野生動物,這些動物一旦感染PPR,將造成巨大的損失。 目前我國在新疆和西藏地區采用疫苗接種的策略進行該疫病的防控,因此,深入開展小反芻獸疫活疫苗的效力研究對該病的預防和控制起著至關重要的作用。本試驗擬以新疆天康畜牧生物技術股份有限公司生產的6批小反芻獸疫活疫苗為基礎,對其進行最小免疫劑量、疫苗免疫期和疫苗保存期的研究。 1材料與方法 1.1生產用毒種?。玻埃埃罚埃迸校校疑a用基礎毒種,中國獸醫藥品監察所提供。 1.2生產用細胞 ?。郑澹颍锛毎?,代次F151,中國獸醫藥品監察所提供。 1.3MEM 細胞培養液GIBICO公司生產(批號:41500-034)。 1.4試驗動物?。睔q以上山羊和綿羊。 1.5其他常規試劑均由中國獸醫藥品監察所提供。 1.6疫苗制造 按文獻進行疫苗制造和質量檢驗,生產用基礎毒種為200701批PPR毒種;生產用細胞為Vero細胞,代次為F157代;共生產小反芻獸疫活疫苗6批,批號分別為2007002、2007003、2007004、2007005、2007006、2007007 ,由新疆天康畜牧生物技術股份有限公司生產,經檢驗合格的疫苗用于效力研究試驗。 1.7疫苗最小免疫劑量試驗 將2007002、2007003、2007004 批疫苗按文獻規定的方法測定 PPR 病 毒含量,根據病毒含量測定結果,將其稀釋至每毫升 含 104 、103 、1 02 、101TCID 50 。每個劑量經頸部皮下免疫山羊和綿羊各5只,每只羊接種1mL。免疫后21d采血測定血清中PPRV中和抗體效價。 1.8疫苗免疫期試驗 根據最小免疫劑量試驗結果,選?。玻埃埃罚埃埃?、2007006、2007007批疫苗進行疫苗免疫期試驗。將小反芻獸疫活疫苗根據PPR病毒含量檢測結果,用稀釋液稀釋至每毫升含1個免疫劑量(103TCID50/mL),經頸部皮下免疫健康山羊和綿羊,免疫后15個月和26個月分別采血測定小反芻獸疫病毒中和抗體。 1.9疫苗保存期試驗 將2007002、2007003、2007004批疫苗置 -20℃保存15個月后,按文獻規定的方法 進行疫苗質量檢驗。 表1?。杜》雌c獸疫活疫苗的質量檢驗結果 

備注:“﹢”表示該項目檢驗結果為陽性,“-”表示該項目檢驗結果為陰性;病毒含量測定 結果為TCID50/頭份;效力檢驗結果為小反芻獸疫病毒中和抗體效價
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